高效液相不出峰怎么回事(急求)

我是在等浓度洗脱下做得高效液相色谱(甲醇:水=70:30,流速1ml/s),在操作过程中压力稳定,柱温也恒定,设置时间为1小时,除了出现一些杂质峰外,没有主峰出现,这是哪出现问题了呢?与参比波长有关系吗?
在我做之前,其他人做过,而且样品成分很复杂,做完后,没有清洗样品池,现在进其他样品,均不出峰,只有进异丙醇时,才出峰。是不是进样口堵塞,样品池被污染,还是其他方面的原因呢?

洗脱剂有机相比例不够 加很大 看看是不是有东西出来 尤其你用异丙醇就出峰 有可能是极性问题 波长当然有关系了 查查紫外吸收曲线 大于0.5 比较合适 堵了就卸下来 用甲醇超超声 但是我认为堵的可能性比较低。
温馨提示:内容为网友见解,仅供参考
第1个回答  2010-01-27
参考文献色谱条件(波长,柱子,流动相),首先看选的波长是否合适,再看你要测样品的结构,如果你的主要物质极性比较小,那就再把流动相里有机相比例提高,要不就换乙腈试试,如果有酸性或碱性集团就试一试加点酸或缓冲盐调下pH.
第2个回答  2010-01-28
如果都和以前的是一样的,而且杂质峰还出来,说明检测器的波长不准了
第3个回答  2010-02-02
你做的是什么样品,柱子合适不?不同的柱子会有不同的效果,和波长肯定有关系了。如果不确定合适的波长可以放到紫外下扫描一下最大吸收峰

也就是说,之前的人有作出结果来,而你现在不行了?那就走甲醇,0.1流速走通宵,不敢走通宵的话就走一整天,然后再看看结果,实在不行联系工程师本回答被提问者采纳
第4个回答  2010-01-27
1 你跑了标准品了没,有的话就是你的样品的问题
2 标准品也没有的话,就是你的柱子的问题
相似回答