在基因工程中,获取目的基因的方法有哪些?

如题所述

..刚好学到
基因工程流程的第一步就是获得目的DNA片段,如何获得目的DNA片段就成为基因工程的关键问题。所需目的基因的来源,不外乎是分离自然存在的基因或人工合成基因。常用的方法有PCR法、化学合成法、cDNA法及建立基因文库的方法来筛选

直接获取
1.从基因文库中获取 这个没什么就是现成的基因储存在受体菌上你用的时候提取出来就好了(基因组文库法 就是原教材中的用限制性内切酶直接获取。利用λ噬菌体载体构建基因组文库的一般操作程序如下:① 选用特定限制性内切酶, DNA进行部分酶解,得到DNA限制性片段② 选用适当的限制性内切酶酶解λ噬菌体载体DNA。③ 经适当处理,将基因组DNA限制性片段与λ噬菌体载体进行体外重组。④ 利用体外包装系统将重组体包装成完整的颗粒。⑤ 以重组噬菌体颗粒侵染大肠杆菌,形成大量噬菌斑,从而形成含有整个DNA的重组DNA群体,即文库。)经典解释
2.cDNA文库法(即原教材中提到的逆转录法)。cDNA文库,是指汇集以某生物成熟mRNA为模板逆转录而成的cDNA序列的重组DNA群体。虽然可用基因组文库法来获取真核生物的目的基因,但是由于高等真核生物基因组DNA文库比其cDNA文库大得多,相关工作量同样大得多。更为重要的是,在真核生物基因组中合有大量的间隔序列或内含子,但在大肠杆菌等原核生物中没有类似序列的存在,所以大肠杆菌不能从真核生物基因的初级转录本中去除间隔序列,即不能表达真核生物DNA。而在真核生物成熟mRNA中已不存在间隔序列(已在拼接过程中被去除),所以可以以真核生物成熟mRNA为模板,逆转录而成的cDNA可被大肠杆菌表达。因此,在基因工程中,cDNA文库法是从真核生物细胞中分离目的基因的常用方法。
3.直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”,又叫“散弹射击法”。这种方法有如用猎枪发射的散弹打鸟,无论哪一颗弹粒击中目标,都能把鸟打下来。鸟枪法的具体做法是:用限制酶(即限制性内切酶)将供体细胞中的DNA切成许多片段,将这些片段分别载入运载体,然后通过运载体分别转入不同的受体细胞,让供体细胞所提供的DNA(外源DNA)的所有片段分别在受体细胞中大量复制(在遗传学中叫做扩增),从中找出含有目的基因的细胞,再用一定的方法吧带有目的基因的DNA片段分离出来。如许多抗虫,抗病毒的基因都可以用上述方法获得。

用“鸟枪法”获取目的基因的优点是操作简便,缺点是工作量大,具有一定的盲目性。

人工合成
1.(主要是序列已知的基因)。主要是通过DNA自动合成仪,通过固相亚磷酸酰胺法合成,具体过程可以网上查询,反正是可以按照已知序列将核苷酸一个一个连接上去成为核苷酸序列,一般适于分子较小而不易获得的基因。对于大的基因一般是先用化学合成法合成引物,再利用引物获得目的基因。
2.聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究 的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研 究和检测鉴定。过去几天几星期才能做到的事情,用PCR几小时便可完成。PCR技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑
他只是给目的基因的扩增追问

谢谢你,学霸

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在基因工程中的目的基因可以通过哪三种途径获得
1、原位提取(即细胞中直接分离提取)2、从DNA文库中获取(普遍采用)3、人工合成目的基因

获取目的基因的方法有哪些(详细)
因此,在基因工程中,cDNA文库法是从真核生物细胞中分离目的基因的常用方法。3.直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”,又叫“散弹射击法”。这种方法有如用猎枪发射的散弹打鸟,无论哪一颗弹粒击中目标,都能把鸟打下来。鸟枪法的具体做法是:用限制酶(即限制性内切酶)将供体细胞中的DNA切成许多片段...

获取目的基因的方法有哪些
获取目的基因的方法有哪些如下:1、从基因文库中获取。将含有某种生物的许多DNA片段导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物不同的基因,称为基因文库,根据目的基因的有关信息,如根据基因的核苷酸序列,基因的功能,基因在染色体上的位置等特性来获取目的基因。2、人工合成。根据已知多肽链的氨...

获取目的基因的两大途径
(1)在基因工程中,获取目的基因主要有两大途径,即人工合成和从生物材料中分离,人工合成可通过反转录法或人工化学合成法,从生物材料中分离即通过基因文库法.(2)由于cDNA文库中只含有叶细胞已转录(或已表达)的基因,而基因组文库中含有该植物的全部基因,故两个文库相比,cDNA文库中含有的基因数目...

[生物--选修模块3:现代生物科技技术]如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺...
(1)基因工程中获取目的基因的方法有三种:从基因文库中获取目的基因、利用PCR技术扩增目的基因、人工合成法:包括反转录法和化学合成法.(2)据图,仅将人乳铁蛋白基因切割下来,需要在人乳铁蛋白基因的左侧用BamHⅠ切割,右侧用HindⅢ切割.当人乳铁蛋白基因和质粒连接成重组质粒后,tetR基因被人乳铁...

请据图回答有关生物工程问题:(1)如果人干扰素基因核苷酸序列是已知的...
(1)目的基因的获取方法有:①从基因文库中获取;②人工合成(反转录法和化学合成法);③PCR技术扩增目的基因,如果人干扰素基因核苷酸序列是已知的,则可以用化学(PCR)方法合成人干扰素基因.(2))③过程为将牛受精卵培养成囊胚的过程,用到的生物技术是早期胚胎培养(动物细胞培养),囊胚的内细胞...

基因工程中目的基因的获取方法
反转录法 这种方法是在核糖体合成多肽的旺盛时期,首先把含有目的基因的mRNA的多聚核糖体提取出来,分离出mRNA,然后以mRNA为模板,用反转录酶合成一个互补的DNA,即cDNA单链,再以此单链为模板合成出互补链,就成为双链DNA分子.这种方法专一性强,但是操作过程比较麻烦,特别是mRNA很不稳定、生存时间短,所以...

根据mRNA的信息推出获取目的基因的方法是
获得目的基因的方法:①从基因文库中获取 ②利用PCR技术扩增 ③人工合成(化学合成)。根据mRNA的信息推出获取目的基因的方法属于人工合成,即用mRNA,在反转录酶的作用下,通过反转录形成目的基因,所以选C。考点:基因工程 点评:本题难度一般,要求学生识记基因工程的相关知识,考查学生对基因...

目的基因的获取
选修三的1.2基因工程基本操作中的目的基因获取主要介绍了两种方法。一、从基因文库中获取目的基因。形象的说,就是相当于“从图书馆中找到你要的那本图书”。基因文库是前人已经构建好的受体菌群体,整个群体已经包括所有该物种的基因,你只需要通过目的基因的位置或转录产物mRNA、蛋白质等的特异性的表现...

如何从基因文库中获取目的基因?
获得目的基因的方法:一、构建基因文库 提取总DNA。用限制性内切酶将总DNA切成小片段,连到质粒或噬菌体载体上,把这些质粒转化到细菌,随着细菌繁殖而复制,这个过程又称为基因克隆(gene clone)将总DNA包含的基因组各片段分别克隆在质粒或噬菌体载体上,便构成了该生物的基因文库(gene library)。二、...

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