基因工程的基本步骤中，首先是要获得足够多的目的基因．下图示意采用“鸟枪法”扩增目的基因，获取目的基

基因工程的基本步骤中，首先是要获得足够多的目的基因．下图示意采用“鸟枪法”扩增目的基因，获取目的基因的大致过程如图．请据图回答下列问题：（1）过程①要对供体细胞所有 DNA使用______酶，这样得到的DNA片段中含有或不含有______．（2）过程②所得到的质粒是一种小型______，它可以在细胞内独立复制，一般来说它所表达的产物______细胞生存所必需的．（3）过程③需要使用与①相同的______酶及______酶，才能将质粒与供体细胞DNA片段重组．（4）过程④往往要用氯化钙处理细胞，以增大______的通透性，有利于______．此外，还要在细菌培养基中加入______，这类培养基属于______，能在此培养基上生存并增殖的细菌就是接受了重组质粒的细菌．（5）重组质粒在宿主细胞中大量复制，就会使______．然后，在过程⑤中进一步筛选、分离，得到大量含目的基因的质粒．（6）过程⑥需要将重组质粒上的目的基因分离纯化出来，首先可用______过程中曾使用过的那种______酶，将目的基因与原质粒部分分割开，然后可用______等适当方法得到纯化的目的基因DNA片段．

（1）①表示用限制性内切酶对供体细胞所有DNA进行切割，这样得到的DNA片段中含有或不含有目的基因．
（2）质粒是一种小型环状DNA分子；一般来说，质粒所表达的产物不是细胞生存所必需的．
（3）③表示基因表达载体的构建过程，该过程首先需用同种限制酶切割含目的基因的DNA片段和质粒，再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒．
（4）将目的基因导入细菌细胞采用感受态细胞法，即用氯化钙处理细胞，以增大细菌细胞壁的通透性，有利于重组质粒进入细胞．此外，还要在细菌培养基中加入抗菌药物，以便筛选出转化细胞，因此这类培养基属于选择培养基，能在此培养基上生存并增殖的细菌就是接受了重组质粒的细菌．
（5）重组质粒在宿主细胞中大量复制，就会使目的基因得到扩增．
（6）过程⑥需要将重组质粒上的目的基因分离纯化出来，首先可用①③过程中曾使用过的那种限制性内切酶，将目的基因与原质粒部分分割开，然后可用离心分离等适当方法得到纯化的目的基因DNA片段．
故答案为：
（1）限制性内切    目的基因
（2）环状DNA分子    不是
（3）限制性内切   DNA连接
（4）细菌细胞壁    重组质粒进入细胞    抗菌药物    选择培养基
（5）目的基因得到扩增
（6）①③限制性内切   离心分离

温馨提示：内容为网友见解，仅供参考

当前网址：https://11.t2y.org/zz/vs7p7ms7qpvs8pffv2.html