麻烦正面回答一下,起码说一下括号里的内容
为什么DNA连接酶对所连接的DNA两端的序列没有专一性的要求呢?
在构成重组质粒时,两个黏性末端碱基互补,由DNA连接酶可以连接上磷酸二酯键,这没有疑议。但是另一端两个平末端也能由DNA连接酶连接上,DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求?答案为“否”。
平末端能用DNA连接酶连吗
可以的。DNA连接酶分为两类,一类是E。coli DNA连接酶,只能连接黏性末端;一类是T4 DNA连接酶,既能连接黏性末端,又能连接平末端,但连接平末端之间的效率比较低。
平末端不同的两个DNA可以连接到一起么
可以,在平末端两端连接一个互补的黏性末端就可以了。
不同的平末端可以用dna连接酶连起来吗
两种DNA连接酶都有将两个带有相同粘性末端的DNA分子连在一起的功能,而且T4噬菌体DNA连接酶还有一种大肠杆菌DNA连接酶没有的特性,即能使两个平末端的双链DNA分子连接起来。但这种连接的效率比粘性末端的连接率低,一般可通过提高T4噬菌体DNA连接酶浓度或增加DNA浓度来提高平末端的连接效率。T4噬菌体DNA...
DNA连接酶可以连接不同限制酶切的酶切点吗
应该是可以的, 黏性末端不一定要相同,只要能够相互配对就行,两个平末端也可以的
T4DNA连接酶能连接任意两个平末端吗?
没有序列识别的功能,他就是简单的催化相邻DNA链的5-P末端和3'-OH末端以磷酸二酯键结合的反应,需ATP作辅酶。不仅可以催化粘性末端之间或平滑末端之间的DNA的连接,也催化DNA与RNA之间以及少数RNA之间的连接。
dna连接酶有没有专一性?不同黏性末端或者平末端是否能够用
换句话说,如果一个DNA片段的末端序列是GATCC,而另一个片段的末端序列是AATTC,这两段DNA在进行连接时无法形成稳定的碱基配对,因此无法通过DNA连接酶实现连接。这里需要提及一种特殊情况,即同尾酶(同一种酶在切割不同序列时产生的末端)产生的黏性末端。例如,BamHI和BglII,SpeI和XbaI等,它们虽然识别...
DNA连接酶为什么没有专一性要求
DNA连接酶对序列没有要求,但需要被链接的DNA的接头为同尾酶酶切造成的可互补的末端或平末端。
DNA连接酶连接酶
粘末端连接反应通常在室温或16℃下1~3小时完成,而平末端连接则可能需要过夜。10x Ligation Buffer在使用前需室温融化,避免ATP降解,T4 DNA连接酶需在冰上保存,避免高温失活。热稳定DNA连接酶(thermostable DNALigase)则是一种耐高温的核酸酶,来源于Thermoactinomyces thermophilus,能在85℃甚至94℃的...
生物基因工程为什么总是说粘性末端,而不说平末端?
T4DNA连接酶可以连接平末端 但是平末端相对来说连接效果没有粘性末端好 如果两个平末端是用同种限制酶切割 也就是核苷酸序列反向对称 连接的效果好一些 如果两个平末端不一样 接就是核苷酸序列不反向对称 不太可能连接上