SDS-PAGE电泳检测灵敏度

一般对于SDS-PAGE上样量都是说上样多少ul,我想问下,SDS-PAGE能检测到的蛋白质的最少质量是多少,也就是样品中至少要含有多少mg的蛋白质我们才能检测到。

一般认为是 ug 量级。以每条带 能观察到的蛋白质总量为比较对象。
1. 跟你的样品纯度有关。如果是一个纯蛋白,需要上样量就极少,可以到1ug 甚至更少。如果有10条带的话,那就增加总量大概10倍(10种蛋白含量相当的话),使你的目标能看到为止,实践中需要摸索尝试。
2. 跟染色方法有关,银染色比考马斯亮蓝法染色敏感100-1000倍。
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第1个回答  2011-04-07
那要看你用什么染色,考马斯亮蓝法染色:每条带0.1-1ug,印染色:每条带2-10ng。但是蛋白质浓度太大的话分离效果也不是很好,100ug/ml的蛋白溶液20ul上样,跑出的条带就很好。
第2个回答  2011-04-09
微克量级。
第3个回答  2011-04-07
微克量级。

SDS-PAGE电泳检测灵敏度
1. 跟你的样品纯度有关。如果是一个纯蛋白,需要上样量就极少,可以到1ug 甚至更少。如果有10条带的话,那就增加总量大概10倍(10种蛋白含量相当的话),使你的目标能看到为止,实践中需要摸索尝试。2. 跟染色方法有关,银染色比考马斯亮蓝法染色敏感100-1000倍。

sds-page凝胶电泳原理
SDS-PAGE凝胶电泳的特性 1、在一定浓度时,凝胶透明,有弹性,机械性能好。2、化学性能稳定,与被分离物不起化学反应,在很多溶剂中不溶。3、对pH和温度变化较稳定。4、几乎无吸附和电渗作用,只要Acr纯度高,操作条件一致,则样品分离重复性好。5、样品不易扩散,且用量少,其灵敏度可达10-6ug。6...

sds- page是什么?
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳具有较高的灵敏度,一般只需要不到微克量级的蛋白质,而且通过电泳还可以同时得到关于分子量的情况,这些信息对于了解未知蛋白及设计提纯过程都是非常重要的。

sds-page优缺点
2、SDS-PAGE通过染色和显影,能够检测到微量的蛋白质,具有较高的检测灵敏度。3、蛋白质样品不需要进行复杂的处理,只需加入SDS和染料即可。缺点:1、SDS-PAGE主要是根据蛋白质的分子量进行分离的,无法分辨多聚体蛋白质和其他复合物。2、SDS-PAGE对于样品中电荷和疏水性差异较为敏感,会导致蛋白质的电...

SDS-PAGE蛋白电泳实验总结(1)
2. 样品缓冲液的离子强度:保持低离子强度(10~100mmol\/L),利于SDS单体的充分结合。3. 二硫键还原:还原剂如β-巯基乙醇和DTT应彻底还原二硫键,以实现解聚和结合。β-巯基乙醇适用于碱性环境,DTT稳定性较差,需注意避免与Ni柱纯化His标签蛋白的使用冲突。通过控制这些因素,SDS-PAGE电泳能够有效地...

sdspage最低能检测到多少
1~5ng。sdspage是十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳的英文缩写,而sdspage最低能检测到1~5ng,是聚丙烯酰胺凝胶电泳中最常用的。

sds-page检测目的蛋白质,电泳结果如何?
SDS-page不连续电泳中,浓缩胶使用pH6.7的Tris-HCL缓冲系统,分离胶使用pH8.9。电泳缓冲液采用Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,弱酸性环境下甘氨酸解离较少,与CL离子形成低导电性区带,蛋白质在两者之间泳动。导电性与电场强度成反比,形成高电压剃度,将蛋白质浓缩为狭窄区带。样品进入分离胶后,...

十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳简介
SDS-PAGE,即十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是一种在含有阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)的溶液中进行的蛋白质分离和分析技术。SDS通过与蛋白质分子结合,消除其天然电荷的不均匀分布,使得电泳过程中的迁移速率主要由蛋白质的分子量决定。1克SDS通常能与1.4克的蛋白质形成电荷密度相对稳定的...

SDS-PAGE凝胶电泳的实验技巧+经验问答+操作SOP
SDS-PAGE电泳技术利用聚丙烯酰胺的分子筛特性分离蛋白质,其原理是SDS与蛋白质结合,使蛋白质带负电,迁移率仅取决于分子量。在15KD至200KD范围内,分子量与迁移率呈线性关系,通过标准曲线可测定未知蛋白的分子量。制胶缓冲液的选择至关重要,浓缩胶pH6.7,分离胶pH8.9,以确保蛋白质在电泳过程中的...

sdspage电泳染色的方法有哪些比较下限
马斯亮蓝染色和银染。银染更灵敏,具体下限查分子克隆,蛋白量太少,用westernblot检测,更灵敏,可以检测到pg以及更低的浓度。

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