二次PCR的产物电泳图观察,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从投拖...
非特异性扩增太多，建议稀释模板。提高退火温度，再试试。还有如果一次PCR产物也是如此，建议切胶回收与目的条带相近处的弥散带作为二次的模板。
PCR产物电泳时没有明显的条带,但有拖尾,maker无拖尾。反映体系如下...
你的PCR反应体系中没有加MgCl2吗？Mg2+在PCR反应中发挥了重要作用，Mg2+浓度越高，Taq酶活性越强，条带越亮，但非特异性也较强，杂带越多；Mg2+浓度过低则影响PCR扩增产量，甚至使PCR扩增失败而没有扩增条带。那个拖尾可能是引物二聚体
这是我的pcr产物凝胶电泳图,哪位大神可以解答一下,为什么会出现前后拖 ...
正常现象，没必要大惊小怪，你如果是用基因组作为模板的话，出现拖尾是很正常的现象，毕竟基因组序列那么大，出现一些与引物部分序列互补的序列区间也是可能的，如果是其他的DNA作为模板，则有可能是你的模板不纯造成的，另外体系中有些物质，比如SDS也可能显示一些假带，造成判带困扰，所以你可以无视这...
RT-PCR产物电泳结果只有引物二聚体,没有目的条带,更换引物了也这样...
对于极低表达丰度的目标，一轮PCR很有可能得不到产物，这是建议使用NESTED PCR，就是设计2套嵌套的引物，第一轮先用外面的那对，理论上可以得到一个比较大的产物（跑胶不一定能看到），然后稀释PCR产物50倍，再用里面那对引物扩一次，一般可以得到跑胶看得见的产物量。3. 关于引物设计，推荐使用Primer...
为什么PCR跑不出来,都弥散了
弥散的原因比较多：1、PCR产物是否在扩增结束后立即进行电泳，电泳液是否是新鲜的，如果不是很可能导致扩增产物降解。2、PCR体系没摸索出来，用正交试验找出正确的PCR体系，不要单纯根据别人的试验资料去做，不要太相信文章中的数据，谁都会保护自己的试验结果和数据的。3、扩增所用的引物设计的不好，找...
PCR的电泳图,求高手分析
再分成十来个管，放到PCR仪不同的位子，反应完后一起电泳，看一看结果是否一样。PCR说起来简单，但出问题了很难找到原因的。如果你小量配的话，比如引物加得量小，只有1ul左右的话，可能是加样误差引起的。这样你可以把通用的配上一大批分装冻起来，用量加入不通用的部分 ...
各位高手,我的PCR条带弥散,阴性对照也弥散,但是不加引物不弥散,当然也...
先假设你所用的试剂都是正常的，你可以选择两到三对PCR产物片段较长的引物做试验（比你此次出问题的实验所选的要长），进行正常PCR，电泳看结果是如何，如果不出现弥散现象，可初步判断为气溶胶污染。接着选两到三对产物片段较短的做实验（同上），观察结果，如果同样出现弥散现象，此时可断定确实是气...
请教关于PCR产物电泳出现弥散条带
ABI primer express 3 和 Invitrogen Vector NTI 10)通常是非特异扩增过多引起，提高退火温度试试 PCR产物放置过久考虑产物降解；如果是PCR后及时上样，考虑引物特异性较差或者模板不纯（包括降解以及掺有别的DNA序列）如果用PCR产物做模板的话，量太大也会有这个现象。胶没煮好也会这样 ...
pcr产物跑电泳为什么会有长长的尾巴?
“尾巴”朝上：如果尾巴是弥散的，像雾一下，而你的目的条带又比较直，那么可能是你拿来作为模板的DNA加多了，而如果目的条带弯成了很明显的“微笑状”，那么可能是你的PCR产物太浓了。如果尾巴不是弥散的，而是有一条一条的杂带，那么可能是你的PCR不特异，需要提高退火温度或者换引物。“尾巴”朝...
求高手,PCR条带不清晰的原因,请指导,万分感谢。
导致引物二聚体的产生，同时，引物又不够特异。所以最根本的解决办法就是重新设计引物。或者你也可以做热启动PCR同时提高下退火温度缩短退火时间，这些都可以帮助去除非特异和引物二聚体。我不建议你做二次PCR，你这个结果如果做二次，基本你就看不到什么主带反而你的非特异会被P得很亮。
