新买的高效液相色谱柱在正式使用之前需要做什么?比如什么配比的流动相冲洗?

如题所述

新购买的“高效液相色谱柱”一般 需要做一下3点:
1:用甲醇冲洗柱子30分钟到1个小时;
2:在1的步骤下,使用甲醇:水=1::9 作为流动相冲洗柱子30分钟以上;
3:完成上面2步才能用流动相冲洗柱子30分钟以上。再进样。

上面得甲醇为色谱级,水一般选择超纯水、二次蒸馏水。流动相都需过0.45um的膜过滤、脱气才可以使用。
另外:流动相应选择合适的PH更好的保护柱子
温馨提示:内容为网友见解,仅供参考
第1个回答  2011-05-04
新购买的“高效液相色谱柱”一般 需要做一下3点:
1:用甲醇冲洗柱子30分钟到1个小时;
2:在1的步骤下,使用甲醇:水=1::9 作为流动相冲洗柱子30分钟以上;
3:完成上面2步才能用流动相冲洗柱子30分钟以上。再进样。

上面得甲醇为色谱级,水一般选择超纯水、二次蒸馏水。流动相都需过0.45um的膜过滤、脱气才可以使用。
另外:流动相应选择合适的PH更好的保护柱子
第2个回答  2011-05-01
反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈-水中的;由于色谱柱在储存或运输过程中固定相可能会干掉,影起键合相的空间结构发生变化。因此新柱子要充分平衡。
反相色谱柱的平衡方法:
1.以乙腈或甲醇(最好是色谱纯的)为流动相,流速:0.2mL/min 冲一夜。
2.流速改为0.8mL/min 冲上30min直到基线水平为止。
正相:改用正庚烷或正己烷。
以上均为硅胶键合相色谱柱!
第3个回答  2011-04-29
主要是看你购买的是哪个品牌的液相,首先应该进行性能测试,对各个部件的性能有所了解,大部分的液相都可以用乙腈比水进行冲洗系统,希望我的答案能帮到你。

新买的高效液相色谱柱在正式使用之前需要做什么?比如什么配比的流动相冲...
新购买的“高效液相色谱柱”一般 需要做一下3点:1:用甲醇冲洗柱子30分钟到1个小时;2:在1的步骤下,使用甲醇:水=1::9 作为流动相冲洗柱子30分钟以上;3:完成上面2步才能用流动相冲洗柱子30分钟以上。再进样。上面得甲醇为色谱级,水一般选择超纯水、二次蒸馏水。流动相都需过0.45um的膜过...

高效液相色谱在使用前怎么冲洗系统和色谱柱
1、一般使用前用80%的甲醇冲洗20倍(推荐值)柱体积,应考虑柱前仪器的死体积(约5-10ml),可以不接柱子大流速3-5ml\/min,冲3-5分钟,然后更换流动相即可.2、使用后用可用80%甲醇冲洗保存,如果长期不使用,建议用纯甲醇或乙腈保存.原则上是根据流动相组分不要在柱子中产生难溶有机盐类.

高效液相色谱柱操作注意事项
清洗色谱柱时,需根据所分析样品的特性选择合适的流动相。对于硅胶柱,先用甲醇清除极性杂质,再用干燥的二氯甲烷和正庚烷依次活化;而键合相柱则通常采用甲醇、氯仿、甲醇和水的顺序冲洗。每种色谱柱的清洗方法均有其特定标准,务必参照使用说明书进行。在存放色谱柱时,应先清除杂质和盐分,并使用合适的...

每次使用之后的高效液相色谱柱都要清洗吗,如何冲洗?
如果你的柱子流动相里面没有盐,那就没必要冲洗了。冲洗方法:反相柱子最好保存在纯甲醇或者纯乙腈里面,但是盐不溶于纯有机相。所以中间过渡甲醇水或者乙腈水。究竟用什么,要看你的流动相。比如,我用的是磷酸盐缓冲液-乙腈(70:30)的流动相,那么冲洗的时候最好选用10%-15%乙腈水,冲洗1.0ml...

新买的液相色谱柱,在实验之前要做怎样的处理
要先进行老化,最简单快捷的方法是用你准备跑样的流动相先平衡2个小时左右,再跑几针样品,直至主峰的保留时间稳定下来就可以用了。最好在使用之前测试下柱效,方便以后诊断故障或做比较。

高效液相色谱仪的操作步骤及注意事项
4.反相高效液相色谱仪冲洗柱子时,应尽量避免使用纯水流动相冲洗柱子,因为水极性强,会损害色谱柱(反相高效液相色谱仪的色谱柱C18是非极性的),导致柱效下降。5.冲洗色谱柱时,还可辅助以不同比例的混合流动相冲洗色谱柱,以冲出不同极性的残留物质,但最后还是要用纯有机流动相冲洗色谱柱一段时间。6...

高效液相色谱仪如何用水冲系统
根据你使用的色谱柱和用过的流动相来决定用什么样的溶剂来冲洗系统。如果用过盐或者酸,必须用9比1的水和合适的有机溶剂先冲洗一段时间,将其中的盐分冲洗干净,防止结晶,然后逐渐提高有机相的比例来冲洗,冲洗时间可以根据柱子的死体积来计算,最后用纯有机相来冲洗,最好是乙腈,因乙腈不容易挥发,...

高效液相色谱柱在作样前和作样后如何平衡
所以每次使用前:先用1.0ml\/min的流速冲洗30min的10%甲醇水,然后上流动相平衡,大约30min基线跑平了就可以进样了。每次使用后:同样冲洗30min的10%甲醇水,把流动相里面的缓冲盐冲洗掉,然后用甲醇冲洗30min封存。其中的30min是大约10倍的色谱柱柱体积,针对的是比较常见的250mm*4.6mm内径的柱子...

高效液相色谱柱第一次使用时应如何清洗
用水\/有机相(10\/90~5\/95),以0.3-0.6ml\/min流速冲洗2h以上,再用100%有机溶剂,以0.3-0.6 ml\/min流速冲洗1h以上,最后用100%有机溶剂,以1.0 ml\/min流速冲洗1h以上。

高效液相色谱实验之前流动相应如何处理?为什么
混合摇匀(为了使流动相混合均匀)减压抽滤(为了去除溶液里面的气泡。因为液相色谱仪器很精密,气泡进入仪器会堵住泵,堵住色谱柱)超声(也是为了脱气和混合。不过主要是为了溶剂瓶壁上和溶液之间的气泡)

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