1. 戴一次性手套，若不小心溅上反应液，立即更换手套；
2. 使用一次性吸头，严禁与PCR产物分析室的吸头混用，吸头不要长时间暴露于空气中，避免气溶胶的污染；
3. 避免反应液飞溅，打开反应管时为避免此种情况，开盖前稍离心收集液体于管底。若不小心溅到手套或桌面上，应立刻更换手套并用稀酸擦拭桌面；
4. 操作多份样品时，制备反应混合液，先将dNTP、缓冲液、引物和酶混合好，然后分装，这样即可以减少操作，避免污染，又可以增加反应的精确度；
5. 最后加入反应模板，加入后盖紧反应管；
6. 操作时设立阴阳性对照和空白对照，即可验证PCR反应的可靠性，又可以协助判断扩增系统的可信性；
7. 尽可能用可替换或可高压处理的加样器，由于加样器最容易受产物气溶胶或标本DNA的污染，最好使用可替换或高压处理的加样器。如没有这种特殊的加样器，至少PCR操作过程中加样器应该专用，不能交叉使用，尤其是PCR产物分析所用加样器不能拿到其它两个区；
8. 重复实验，验证结果，慎下结论。
PCR加样有什么需要注意的?
1. 戴一次性手套，若不小心溅上反应液，立即更换手套；2. 使用一次性吸头，严禁与PCR产物分析室的吸头混用，吸头不要长时间暴露于空气中，避免气溶胶的污染；3. 避免反应液飞溅，打开反应管时为避免此种情况，开盖前稍离心收集液体于管底。若不小心溅到手套或桌面上，应立刻更换手套并用稀酸擦拭...
pcr实验中的注意事项
pcr实验中的注意事项如下：1、电子称的使用，要时刻注意保持电子称的精确性，保持清洁，根据不同的浓度的胶称琼脂糖。2、加TAE（化学试剂）的量要适当，以免配出来的胶太薄导致胶孔太浅或浓度太低。3、倒胶前胶托一定要洗干净，并擦干；倒胶时要待胶冷到一定温度摇匀尽量不要产生气泡。若胶液的温...
我想问做PCR扩增应该注意的事项?
)PCR扩增产物污染.这是PCR反应中最主要最常见的污染问题,所以,扩增区的仪器什么如枪头等要注意。还有一种容易忽视,最可能造成PCR产物污染的形式是气溶胶污染;在空气与液体面摩擦时就可形成气溶胶,在操作时比较剧烈地摇动反应管,开盖时、吸样时及污染进样枪的反复吸样都可形成气溶胶而污染.据计算一个气溶胶颗粒...
做q-PCR需要注意哪些方面?
3、加样的时候注意更换枪头，避免交叉污染；4、有时需要预混后分别加入8联排管，需要考虑沾壁的损失，一般可以打出1.5个样的富余量；5、千万不要在反应管的盖上或壁上做标记，会影响荧光读数，整个过程严格戴口罩手套，保持管底清洁，否则会造成标准差大；6、8联排盖盖子时要小心，避免液体溅出，...
PCR的加样顺序是怎么样的?
水、buffer、镁、引物、模板、dNTP、聚合酶。一般来说镁、引物、模板、dNTP四个顺序无所谓，酶要最后加，水和buffer要先加。
带有3c间隔的序列pcr需要注意什么
1、成败的关键在引物,所以引物设计要特异性好,如果是Taqman法,探针设计要特异性好,可以尝试文献报道的序列；2、模板是基础,抽提的mRNA要注意保存,添加RNase抑制剂,尽快转录成cDNA,在-80度保存；3、加样的时候注意更换枪头,避免交叉污染；4、有时需要预混后分别加入8联排管,需要考虑沾壁的损失,一般...
PCR加样顺序是怎样的
一般在0.2mlPCR微量离心管中配制50微升反应体系。dd water 32微升 10*PCR buffer（不含氯化镁） 5微升 氯化镁 3微升 dNTP 4微升 Primer1 2微升 Primer2 2微升 模板DNA 1微升 Taq酶 1微升 再将离心管置于PCR反应体系中，即可。
动物源性荧光PCR检测过程中需注意的问题?
由于分子检测荧光探针法的灵敏度非常高，故在实验操作过程中，为防止样品交叉污染及扩增产物的污染，需注意以下事项：1. 严格取样。取样需要按照取样规程来，做到专物专用（如取样袋、剪刀等），禁止一物用在多个样品上。2. 分区操作。需把样品处理、配液分装、PCR扩增，这三个过程分开，在不同的区域的...
干货分享 | Real-time PCR(注意事项、常见问题)下
在进行实时PCR实验时，需注意以下几点：首先，提RNA所用的枪头、器皿等耗材通常为商家处理好的成品，但在特殊情况下，实验者需用DEPC处理这些耗材。此外，市面上存在RNA酶清除试剂，能有效减少RNA降解。然而，清洗RNA沉淀所用的酒精需用DEPC处理后的水配制。其次，RT-PCR检测引物长度应控制在100bp-200bp...
PCR实验操作注意事项有哪些
1、必须拥有标准的的PCR荧光实验室。2、检测设备必须符合标准PCR荧光实验室设置要求 荧光定量PCR仪+实时荧光定量试剂+通用电脑+自动分析软件，构成PCR-DNA\/RNA实时荧光定量检测系统。3、必须通过国家临床检验中心的验收和认证。4、检测人员必须通过国家临检中心业务培训并取得合格证书;PCR实验室内工作人员必须...
