SDS-PAGE应用范围

如题
具体点

SDS-PAGE因易于操作,而具有广泛的用途,是许多研究领域的重要的分析技术。

1. 蛋白质纯度分析;

2. 蛋白质分析量的测定,根据迁移率大小测定蛋白质亚基的分子量;

3. 蛋白质浓度的测定;

4. 蛋白质水解的分析;

5. 免疫沉淀蛋白的鉴定;

6. 免疫印迹的第一步;

7. 蛋白质修饰的鉴定;

8. 分离和浓缩用于产生抗体的抗原;

9. 分离放射性标记的蛋白质;

10. 显示小分子多肽。

SDS-PAGE有效分离范围取决于聚丙烯酰胺的浓度和交联度,其孔径随着双丙烯酰胺与丙烯酰胺比率的增加而减小,比率接近于1:20时,孔径达到最小值。分子量低于10kD的小分子肽类,即使用较高浓度的聚丙烯酰胺凝胶的SDS-PAGE也不能完全分离,或是显不出色,或是显带较弱,带型弥散。且分子量越小,效果也越差。

为了能在SDS-PAGE上显示测定小分子量的多肽,通常采取两种方法:一是增加凝胶的浓度和交联度,在制胶时加入一些可以降低聚丙烯酰胺凝胶网限孔径的溶质分子,使用尿素、甘油或蔗糖等物质;二是选择缓冲液中的拖尾离子的种类和浓度以达到改善多肽的分离效果。

参考资料:丁香通

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sds-page全称
SDS-PAGE的应用范围非常广泛,它已广泛应用于蛋白质样品纯度的评估、蛋白质表达的评估、蛋白质的免疫化学鉴定以及定量鉴定等。

什么是SDS- PAGE技术?
SDS-PAGE因易于操作,而具有广泛的用途,是许多研究领域的重要的分析技术。其主要应用有:1. 蛋白质纯度分析 2. 蛋白质分析量的测定,根据迁移率大小测定蛋白质亚基的分子量 3. 蛋白质浓度的测定 4. 蛋白质水解的分析 5. 免疫沉淀蛋白的鉴定 6. 免疫印迹的第一步 7. 蛋白质修饰的鉴定 8. 分离...

SDS-PAGE应用范围
SDS-PAGE有效分离范围取决于聚丙烯酰胺的浓度和交联度,其孔径随着双丙烯酰胺与丙烯酰胺比率的增加而减小,比率接近于1:20时,孔径达到最小值。分子量低于10kD的小分子肽类,即使用较高浓度的聚丙烯酰胺凝胶的SDS-PAGE也不能完全分离,或是显不出色,或是显带较弱,带型弥散。且分子量越小,效果也越...

sds- PAGE电泳主要用于什么领域?
主要用于分离蛋白质或者核酸,不同浓度的分辨率不一样,比如一定高浓度的胶可以分离质量分数为1000和1100的,而浓度降低后就难以实现1000与1100的分离。化学聚合以过硫酸铵(APS)为催化剂,以四甲基乙二胺(TEMED)为加速剂。在聚合过程中,TEMED催化过硫酸铵产生自由基,后者引发丙烯酰胺单体聚合,同时甲...

sds-page用途
1、蛋白质样品的纯度评估:SDS-PAGE电泳可以清晰地看到样品中蛋白质的条带,从而判断蛋白质的纯度。2、蛋白质表达的评估:正常细胞和病变细胞或不同条件下的细胞中同一蛋白质的SDS-PAGE条带,可以评估蛋白质的表达情况。3、蛋白质的免疫化学鉴定:SDS-PAGE可以结合Westernblot技术,用于鉴定特定蛋白质的...

sdspage优缺点
适用于寡聚蛋白及其亚基的分析鉴定和分子量的测定:对于由亚基或两条以上肽链组成的蛋白质,SDSPAGE能够将其解离成单条肽链,并对其分子量进行测定。2、对于某些特定类型的蛋白质,如超大分子量蛋白质、具有特殊结构或电荷的蛋白质等,SDSPAGE无法获得理想的分离效果。

sds-page和Native-PAGE的差别
1、sds-page:用于分离蛋白质和寡核苷酸。2、Native-PAGE:用于酶的鉴定、同工酶分析和提纯。三、特点不同 1、sds-page:能断裂分子内和分子间的氢键,使分子去折叠,破坏蛋白分子的二、三级结构。2、Native-PAGE:未加SDS的天然聚丙烯酰胺凝胶电泳可以使生物大分子在电泳过程中保持其天然的形状和电荷...

SDS-PAGE的主要应用有哪些
SDS-PAGE又叫做SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳,其作用具体如下:由于SDS PAGE可设法将电泳时蛋白质电荷差异这一因素除去或减小到可以忽略不计的程度,因此常用来鉴定蛋白质分离样品的纯化程度。SDS应用于提纯过程中纯度的检测,纯化的蛋白质通常在SDS电泳上应只有一条带,但如果蛋白质是由不同的亚基组成的,它在...

是否所有的蛋白质都能用SDS—凝胶电泳法测定其相对分子质量?为什么...
② SDS-PAGE分离范围一般在15-200Kd,超过这个范围,蛋白条带都挤在一起了,无法进行准确比较。③ 一些小分子量的蛋白倒是可以通过特殊的SD-PAGE来测定,目前最小的能到1kd。④ SDS-PAGE测出的分子量是蛋白亚基分子量,如果一个蛋白由2个以上亚基组成,那么必须将两个亚基分子量相加,或者通过其他...

sds-page检测目的蛋白质,电泳结果如何?
在15KD至200KD范围内,迁移率与对数分子量线性相关。通过绘制已知分子量标准蛋白质的迁移率与对数分子量图,可确定未知蛋白质的分子量。配胶缓冲液系统对电泳结果产生影响。SDS-page不连续电泳中,浓缩胶使用pH6.7的Tris-HCL缓冲系统,分离胶使用pH8.9。电泳缓冲液采用Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中...

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