pMD19-T载体 是什么

如题所述

pMD®19-T Vector是一种高效克隆PCR产物(TA Cloning)的专用载体。本载体由pUC19载体改建而成,在pUC19载体的多克隆位点处的Xba I和Sal I识别位点之间插入了EcoR V识别位点,用EcoR V进行酶切反应后,再在两侧的3’端添加“T”而成。因大部分耐热性DNA聚合酶进行PCR反应时都有在PCR 产物的3’末端添加一个“A”的特性,所以使用本制品可以大大提高PCR产物的连接、克隆效率。
由于本载体以pUC19载体为基础构建而成,所以它具有同pUC19载体相同的功能。此外,本制品中的高效连接液Solution I可以在短时间内(约30分钟)完成连接反应,其连接液可以直接用于细菌转化,大大方便了实验操作。本制品中的Control Insert(500 bp)还可以用于Control反应。
本载体与pMD®18-T Vector 相比,本制品的 β-半乳糖苷酶的表达活性更高,菌落显示蓝色的时间缩短,菌落显示的蓝色更深。因此,克隆后更容易进行克隆体的蓝白筛选。
简而言之,就是一种可以将taq酶(注意:pfu不具备在产物两端加“A”碱基的能力)扩增的两端带有A碱基的产物连入这种载体,从而通过大肠杆菌扩增的载体,而且可以通过蓝白筛选来筛选阳性克隆,插入成功的为白,不成功为蓝。图谱可以去takara上下说明书。
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pMD19-T载体 是什么
pMD®19-T Vector是一种高效克隆PCR产物(TA Cloning)的专用载体。本载体由pUC19载体改建而成,在pUC19载体的多克隆位点处的Xba I和Sal I识别位点之间插入了EcoR V识别位点,用EcoR V进行酶切反应后,再在两侧的3’端添加“T”而成。因大部分耐热性DNA聚合酶进行PCR反应时都有在PCR 产物的3’...

pMD19-T和pCMV-SPORT6基因载体有什么不同
pMD19-T是一种高效克隆PCR产物的专用载体,以pUC19载体为基础构建而成,具有同pUC19载体相同的功能。pCMV-SPORT6是一种真核表达载体。

哪个T载体上没有SacI和BamHI这两个酶切位点?
T-Vector pMD19 (Simple) 是两侧的3’ 端添加了 “T” 的线性化载体,因大部分耐热性DNA聚合酶进行PCR反应时都有在PCR 产物的3’ 末端添加一个 “A” 的特性,所以使用本制品可以大大提高PCR产物的连接、克隆效率。本载体尽管消除了LacZ基因上的多克隆酶切位点,但不影响β-半乳糖苷酶的正常表...

用pmd-18t载体克隆基因,能用M13测序吗
可以。克隆基因最后这几步你是指什么?你将基因连到T载体上,测序验证对了,就行了。接下来构建载体什么的,直接可以用T载体上序列做模版了。

pMD19-T质粒载体(Simple版,TaKaRa公司怎么样呀?
很好用。 takala公司也就是宝生物,日本企业。在大连设有生产基地,其产品很好用。

pMD19-T质粒载体(Simple版,TaKaRa公司怎么样呀?
宝生物工程(大连)有限公司,简称大连Takara公司,是日本Takara Bio株式会社在中国大连经济技术开发区设立的日本独资企业。该公司成立于1993年8月,专注于生物工程领域,涉及生命科学、农业生物技术、医药科学等多个领域,产品在国际市场上享有盛誉。

全式金pEASY-E1 Expression Kit连接转化求助
目的基因获取方式: DH5α菌提质粒(载体是pmd19-T),用引物进行PCR扩增,获取目的条带后胶回收获得。也胶回收产物用琼脂糖电泳进行了验证。连接E1条件:4μl 目的基因+1μlE1 。1000bp的 25℃ 连接10min; 700bp的25℃8min。PCR仪控温。转化条件:严格按照说明书操作。在感受态刚开始融化的时候...

基因克隆
胶回收的基因片段与商业化的T载体(pMD-18T)连接,形成重组DNA载体pMD18-PVT1(图18),经转化(图19)和菌落PCR(图20)后筛选到候选阳性克隆,再使用Sanger测序(图21)进行插入序列的鉴定,获得阳性克隆。(2) 传统酶切 - 酶连克隆 传统酶切-酶连克隆主要是采用相同的限制性内切酶(或者同尾酶)分别酶切载体和基因片段...

荧光蛋白在大肠杆菌中的表达的实验过程级结果
用PcR方法从质粒pDsRed2-1中扩增获得DsRed2,亚克隆到pMD19-T载体上,然后酶切将DsRed2分别插入到原核表达载体pET-Trx和pGEX-4T1上,转入E.coli BL21(DE3)中,用IPTG诱导表达.在LB平板培养基上或液体培养基中直接观察菌体颜色,最后用SDS-PAGE检测DsRed2蛋白的表达.结果显示构建的重组载体pET-Trx-Ds...

连接用了19t,没用simple有影响吗
有影响。pMD19-T-Vector是线性的,必须是3段有A的目的基因片段才可以和pMD19-T-Vector连接,simple是其中之一。

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