T载体的作用是什么？克隆时为什么要用T载体？

肯定是开环，不然怎么连接。连接的原理就是试剂盒中的载体pmd19-t是已经经过内切酶ecorv反应了的，并且在露出t的一端继续添加几个t，而我们的pcr反应中，在聚合酶的作用下，会在一端添加a，这样它们在反应中就很快连接成功。

我做过几个克隆，没用过T载体，直接将酶切后纯化的产物进行连接，照样可以连接成功，基本上都会有10-50个克隆长出来。我用的是Sal
I和Nde
I这两个酶切位点，似乎这两个都是平端的哦。本回答被提问者采纳