食品安全性毒理学评价程序包括四个阶段,即急性毒性试验,蓄积毒性和致突变试验,亚慢性毒性(包括繁殖、致畸)试验和代谢试验,慢性毒性(包括致癌)试验。
Ames试验的常规方法有斑点试验和平板掺入试验两种,具体操作如下:
1、斑点试验;
吸取测试菌增菌培养后的菌液0.1ml,注入融化并保温45℃左右的上层软琼脂中,需S9活化的再加0.3ml-0.4mlS9mix,立即混匀,倾于底平板上,铺平冷凝。
用灭菌尖头镊夹灭菌圆滤纸片边缘,纸片浸湿受试物溶液,或直接取固态受试物,贴放于上层培养基的表面。同时做溶剂对照和阳性对照,分别贴放于平板上相应位置。
平皿倒置于37℃温箱培养48h。在纸片外围长出密集菌落圈,为阳性;菌落散布,密度与自发回变相似,为阴性。
3.平板掺入试验:
将一定量样液和0.1ml测试菌液均加入上层软琼脂中,需代谢活化的再加0.3ml-0.4ml S9mix,混匀后迅速倾于底平板上铺平冷凝。
同时做阴性和阳性对照,每种处理做3个平行。试样通常设4个~5个剂量。选择剂量范围开始应大些,有阳性或可疑阳性结果时,再在较窄的剂量范围内确定剂量反应关系。培养同上。
同一剂量各皿回变菌落均数与各阴性对照皿自发回变菌落均数之比,为致变比(MR)。MR值≥2,且有剂量-反应关系,背景正常,则判为致突变阳性。
扩展资料:
一、食品安全性毒理学评价实验项目;
第一阶段:急性毒性试验,试验项目:
1.用霍恩氏法、机率单位法或寇氏法,测定经口半数致死量(LD50)。如剂量达10克/公斤体重仍不引起动物死亡,则不必测定半数致死量。
2.必要时进行七天喂养试验。以上两个项目均分别用两种性别的小鼠或大鼠。
第二阶段:蓄积毒性和致突变试验,试验项目:
1.蓄积系数法。用两种性别的大鼠或小鼠,各20只。
2.二十天试验法。用两种性别的大鼠或小鼠,每个剂量组雌雄各10只。以上两种方法任选一种。
第三阶段:亚慢性毒性(包括繁殖、致畸)试验和代谢试验,试验项目:
1.90天喂养试验。
2.喂养繁殖试验。
3.喂养致畸试验。
4.传统致畸试验。
第四阶段:慢性毒性(包括致癌)试验,试验项目:
可将两年慢性毒性试验和致癌试验结合在一个动物试验中进行。用两种性别的大鼠或小鼠。
二:食品安全性毒理学评价实验要求:
1、凡属我国创制的新化学物质,一般要求进行四个阶段的试验。特别是对其中化学结构提示有慢性毒性或致癌作用可能者,产量大、使用面积广、摄入机会多者,必需进行全部四个阶段的试验。
2、凡属与已知物质(指经过安全性评价并允许使用者)的化学结构基本相同的衍生物,则可根据第一、二、三阶段试验的结果,由有关专家进行评议,决定是否需要进行第四阶段试验。
3、凡属我国仿制的而又具有一定毒性的化学物质,如多数国家已允许使用于食品,并有安全性证据,或世界卫生组织已公布每人每日允许摄入量(即ADI,以下简称日许量)者,同时生产单位又能证明我国产品的理化性质、纯度和杂质成份及含量均与国外产品一致,则可以先进行第一、二阶段试验。
如试验结果与国外相同产品一致,一般不再继续进行试验,可进行评价。如评价结果允许用于食品,则制定日许量。凡在产品质量或试验结果方面与国外资料或产品不一致,则应进行第三阶段试验。
食品安全性毒理学评价的程序是什么?Ames实验的具体操作?
食品安全性毒理学评价程序包括四个阶段,即急性毒性试验,蓄积毒性和致突变试验,亚慢性毒性(包括繁殖、致畸)试验和代谢试验,慢性毒性(包括致癌)试验。Ames试验的常规方法有斑点试验和平板掺入试验两种,具体操作如下:1、斑点试验;吸取测试菌增菌培养后的菌液0.1ml,注入融化并保温45℃左右的上层软...
以下哪些内容,属于安全评价的一般程序
第一阶段 急性毒性试验。第二阶段 遗传毒性试验,传统致畸试验,短期喂养试验。第三阶段 亚慢性毒性试验—90d喂养试验,繁殖试验,代谢试验。第四阶段 慢性毒性实验(包括致癌实验)。(2).选用原则 凡属我国创新物质一般要求进行四个阶段试验。凡属已知物质(指经过安全性评价并允许使用者)的化学结果基本...
食品毒理学评价评价程序中规定,需进行四个阶段毒理学实验项目的化学毒物...
第一阶段:急性毒性试验:它是一次性投较大剂量后观察动物的变化,观察期大约为1周,从而判定动物的致死量(LD)和半致死量(LD50)。半致死量是指实验动物死亡一半的投药量。如果投药量大于5000mg\/kg,无死亡,可认为该品毒性较低,无需做致死量精确测定。第二阶段:遗传毒性试验,30 天喂养试验,传...
毒理学安全性评价标准操作规程指南的目录
第十节 死亡灵长类动物的处理程序... 403第十一节 非人灵长类动物职业危害及防护程序... 405第十六章 符合GLP原则的家兔毒性实验... 408第一节 家兔的兽医学管理——接收和检疫... 408第二节 家兔的饲养和管理程序... 414第三节 家兔的操作程序... 420第四节 家兔的临床体征观察程序... 424第五节 ...
麦饭石的药理
根据国家《食品安全性毒理学评价程序》毒性分级标准, 本麦饭石属无毒类物质, 如果作为食品添加剂基本上是安全的。一般药理作用实验结果表明,阜新麦饭石对小鼠有抗疲劳、抗缺氧作用。并能明显延长NaNO2所致组织缺氧的存活时间。生活中关于麦饭石的最新应用 人们主要制作成麦饭石水机 麦饭石茶具 麦饭石碗 麦饭...
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化学致癌物的试验组合
组合中出现阳性越多,受试物致癌可能性就越大。一般在试验组合中,每一遗传学终点只选一个试验即可。在终点相同的各种试验中应优先选择体内试验。我国食品安全性毒理学评价程序中的致突变试验组合有体外试验和整体试验。体外试验中Ames试验为必做项目。在整体试验中,可在微核试验和骨髓细胞染色体畸变中任选...
深圳市的自来水的水质如何?
目前正在执行的《食品安全性毒理学评价程序》(GB15193.1—2003)中规定,评价试验共分四阶段,第二阶段为遗传毒性试验,相关规定为:“从Ames试验或V79\/HGPRT基因突变试验;骨髓细胞微核试验或哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验;小鼠精子畸形分析或睾丸染色体畸变分析中分别各选一项……三项试验中,体内、体外各有一项或以上试验...
新资源食品安全性评价规程的规程正文
第四条 新资源食品安全性评价内容包括:申报资料审查和评价、生产现场审查和评价、人群食用后的安全性评价,以及安全性的再评价。第五条 新资源食品申报资料的审查和评价是对新资源食品的特征、食用历史、生产工艺、质量标准、主要成分及含量、使用范围、使用量、推荐摄入量、适宜人群、卫生学、毒理学资料、国内外相关...