PCR产物电泳条带比预期的大,怎么回事
就看扩增的模板是什么,是不是中间有内含子序列,重新核查从正向引物到反向引物的大小。如果这些都检查了没问题,可以考虑把产物测序,通过序列比对找出原因。
pcr电泳条带偏上
两个原因。根据查询pcr电泳条带相关资料得知,pcr电泳条带偏上原因有:1、是电泳仪出现问题。2、是配胶问题,配胶没配好。
...扩增条带比预期目的条带要大,对PCR扩增产物测序,结果与原序列比对同...
1.先看下PCR电泳图里杂带多不多,若有的话很可能非特异性扩增了 2.若条带干净,仍然有可能存在非特异性扩增,引物特异性不高导致竞争结合 可将DNA直接酶切看是否能切出你的目标片段 3.序列比对结果不能只看相似度,手工找一下看相同的序列出现在哪里怎么分布的,重复序列相似度高的话可能是零散的...
PCR后电泳结果所得目标条带为什么位置会与Marker发生较大偏差?
个人认为和电压有关吧,之前做实验每次电压都是一样的 或者和电泳的时间长短有关 如果pcr产物没变质的话。。左图的亮带应该是引物二聚体的。。会不会是引物的比例太大了?
PCR产物比目的条带大???
大很多吗?有时候电泳跑出来的带和MARKER对不上,但是送去测序的时候是没有问题的。要是你扩的很纯没杂带的话,干脆花几十块钱送去测序,反正现在测序也不贵。
PCR电泳出现非特异条带原因 概括地讲……
PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致,或大或小,或者同时出现特异性扩增带 与非特异性扩增带.非特异性条带的出现,其原因:一是引物与靶序列不完全互补、 或引物聚合形成二聚体.二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低,及PCR循环次数 过多有关.其次是酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而...
PCR结束后,凝胶电泳检测,发现与目的带不一致的条带,可能原因是什么
原因可能是引物与靶序列不完全互补或引物形成二聚体、循环次数过多等。解决方法:减少循环次数。
PCR之后目的条带高低不一致是什么原因
这都正常,其实这些带都是对的.多半是胶不匀造成的,也可能是电泳环境(电势差太高或太低,缓冲液使用过久或刚稀释的导师电解质分布不均匀).如果条带单一或目的带很明显,基本排除PCR体系问题.
10kb pcr产物大小与预期不一致
pcr产物电泳检测的结果只是一个粗略的定性结果。对于与目的片段条带大小只相差几个碱基的非特异性pcr扩增产物是无法用肉眼区分开的。改变pcr条件,重新扩增。或者可以将该pcr产物克隆到质粒中,初步筛选后进行单克隆测序。
基因组PCR扩增条带很宽可能的是什么原因?有哪些可以解决的方案?(连续...
很宽极有可能是扩增出两个或多个大小相近的片段,这种片段测序结果往往都是乱封,是多个序列测序结果叠加在一起的。解决办法,更换特异引物,或者胶浓度加大,比如2%的。电泳时间久一些,比如40分钟,就有可能将其分开,然后再切胶回收。