sds-page电泳出现问题

做肌肉蛋白SDS-PAGE电泳,跑出来的泳带模糊不清且有拖尾的现象,原本应该显示的泳带没有显示出来,或者显示出模糊的一块。只有一条或两条带比较清晰,其他的都模模糊糊。另外考马斯亮蓝染色液如何配制才能取得更好的染色效果(CBB-R250固体)?脱色的时候为何背景颜色不能完全褪色?
回答请具体点不要复制黏贴
貌似我说的不是很明白。哪位做过大鼠肌肉蛋白SDS-PAGE电泳的能否具体说一下方法,特别是点样的时候,我加的是DTT,上样20UL,跑到最后就是跑出3条带。其他的都没跑出来。郁闷。拜托了啊 谁帮忙我再加200分。

电泳的那个问题是不是你点DNA液的时候没点好,要么就是通电的电压没调好

脱色没完全退色是正常的,看的清楚就可以了……

补充:
那就有可能你的DNA没提的很纯,电泳分离不开来……再做遍吧,我跑过兔子跟河蚌的……应该是这个问题
温馨提示:内容为网友见解,仅供参考
第1个回答  2008-11-01
1. 上样量不能太多
2. 点样孔要清洁,样品要沉到底部形成一条带
3. 浓缩胶低电压跑
4. marker如果染得很好,染料就没问题。
5. 脱色液配方及配置时间如何?如果时间长,会挥发。脱色时可稍加热。应该 能脱干净。
第2个回答  2008-11-05
模糊是正常的吧,你跑的又不是单一的蛋白。你用蛋白marker加跑看看,如果marker不拖尾,就说明正常。
另外KAO-G一般的方法配置就好,人家都行,你也行的。
倒是脱色的时候,可以在恒温摇床上摇,隔30min换新鲜的脱色液就会很清晰了
第3个回答  2008-11-03
跑出来有拖带现象,那就是你的蛋白质杂了。

跑出的条带不明显的话应该是你提取的肌肉蛋白的浓度太低了,或者染色时间不够。
第4个回答  2008-11-16
考马斯亮蓝配溶液要用滤纸滤一下

在就是蛋白材料是不是有问题啊,只有三条带。重新做一下材料试试

sdspage电泳胶一半跑不下去
SDS-PAGE电泳胶一半跑不下去可能是以下原因:1. 样品没有处理好,需要重新处理。2. 缓冲液不新鲜,需要更换新的缓冲液。3. 电压过高或过低,需要调整电压。4. 电泳温度过高或过低,需要调整电泳温度。5. 电泳时间过长或过短,需要调整电泳时间。6. 凝胶配制时没有混合均匀或胶中有气泡,需要重新配制...

SDSPAGE电泳为什么会跑歪
带电颗粒在电场作用下,向着与其电性相反的电极移动,称为电泳electrophoresisEP。利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。在确定的条件下,带电粒子在单位电场强度作用下,单位时间内移动的距离即迁移率为常数,是该带电粒子的物化特征性常数。不同带电粒子因所带电荷不同,或虽...

聚丙烯酰氨凝胶电泳常见问题
在SDS-PAGE电泳过程中,配胶缓冲液系统的选择至关重要。浓缩胶采用pH6.7的Tris-HCL缓冲,甘氨酸在此环境下泳动效率低,而氯离子浓度高,形成导电性较低的区带。分离胶的pH8.9使得甘氨酸解离增加,蛋白分子根据电荷和分子大小进行分离。因此,pH对电泳结果影响显著,实验中遇到问题时,应首先考虑这一因...

SDS-PAGE电泳遇到的问题。
电泳仪你可以换一台好的试一下,如果跑出来还这样,下一步,如果好了,那么要么你设置出了问题,电压电流什么的,要么仪器坏了。。缓冲液注意PH 以及SDS的量,可以换一瓶试一下,比如别人配的...如果还是有问题下一步,如果好了,那么...呵呵,话说你可以blame天平~~胶如果配稀了或者没凝好也可...

sdspage条带偏大
1、免疫球蛋白可能过度表达,导致分子量大于正常。2、免疫球蛋白可能有多个亚基结构,导致分子量偏大。3、免疫球蛋白的抗原可能太小,导致分子量偏大。sdspage是聚丙烯酰胺凝胶电泳,PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,用于分离蛋白质和寡核苷酸。

sds-page电泳跑出竖条带,怎么回事
sds-page电泳跑出竖条带多半是配胶的原因 如果胶配制的时候没有搅拌均匀,就有可能在胶浓度较高的地方出现条带变成竖条带 所以sds-page电泳跑出竖条带应该会死配胶的原因,建议充分搅拌均匀

关于sds-page电泳,为什么条带不清晰
sds-page电泳条带不清晰的原因可能有以下几点:可能与电压与电流的设置有 关与菌体蛋白的纯度也有关 或者是蛋白的降解

SDS-PAGE蛋白质电泳问题
至于加样散,原因就可能是胶质不均了。对于结果应该影响不大。电泳时条带歪了,说明分离胶不匀,最前面的溴酚蓝如果不在一条线上,就是这个问题,对于最终结果有影响,建议重做。当然,在灌注浓缩胶前,你可能使用30%酒精封闭过,酒精除不干净,或者滤纸吸干酒精碰触了胶面,都会有影响,前者会让蛋白...

sds-page电泳测定蛋白质相对分子质量,分析看不到条带的地方是否有蛋白...
SDS-PAGE电泳是一种将蛋白质按照分子量大小分离的方法,通常需要使用染色方法(如Coomassie blue染色)来观察电泳条带。如果某些样品在电泳后看不到条带,则可能是由于样品中蛋白质浓度太低或者电泳条件不合适导致的。此时,可以使用Western blot等方法来检测是否存在目标蛋白质。如果Western blot结果呈阳性,...

sdspage电泳电压大小影响
出现偏厚或偏薄造成电泳电压泳泳不上。SDS-PAGE是对蛋白质进行量化的一种方法,电压在100v到300V,超出或小于这个电压会造成出现偏厚或偏薄造成电泳电压泳泳不上。SDS-PAGE这个技术首先是1967年由shapiro建立。

相似回答