1）目的基因制备和分离：一般通过文库筛选、同源序列比对等方法进行克隆。
2）DNA重组载体的构建：选择植物表达载体，根据载体选择或添加酶切位点，然后进行酶切连接，构建重组载体。
3）转化：转化方法有多种：农杆菌法：将重组载体用电击或热激的方法将其转入农杆菌中，再用农杆菌侵染植物；基因枪法：将重组载体与金粉混合后用基因枪轰击组织块；此外还有其他一些方法。
4）植物阳性植株的筛选和鉴定：一般先用抗性初次筛选后，在基因水平上用PCR扩增目的片段或做Southern杂交；在RNA水平上做半定量或Nouthern杂交.
5）基因表达产物的分离纯化和鉴定：这是蛋白水平上的鉴定，一般是提取纯化蛋白，做蛋白分析。
2）DNA重组载体的构建：选择植物表达载体，根据载体选择或添加酶切位点，然后进行酶切连接，构建重组载体。
3）转化：转化方法有多种：农杆菌法：将重组载体用电击或热激的方法将其转入农杆菌中，再用农杆菌侵染植物；基因枪法：将重组载体与金粉混合后用基因枪轰击组织块；此外还有其他一些方法。
4）植物阳性植株的筛选和鉴定：一般先用抗性初次筛选后，在基因水平上用PCR扩增目的片段或做Southern杂交；在RNA水平上做半定量或Nouthern杂交.
5）基因表达产物的分离纯化和鉴定：这是蛋白水平上的鉴定，一般是提取纯化蛋白，做蛋白分析。
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第1个回答 2012-11-23
基因工程的主要内容和步骤。
1）目的基因制备和分离（获得）；
2）DNA重组体的构建（酶切、连接）；
3）DNA重组体的扩增（导入）；
4）重组体筛选和鉴定（筛选）；5）基因表达及产物的分离纯化和鉴定（表达）。本回答被网友采纳
1）目的基因制备和分离（获得）；
2）DNA重组体的构建（酶切、连接）；
3）DNA重组体的扩增（导入）；
4）重组体筛选和鉴定（筛选）；5）基因表达及产物的分离纯化和鉴定（表达）。本回答被网友采纳
第2个回答 2012-11-23
忘差不多了，克隆就是提取细胞核和其他植物的细胞质，基因工程就是截取一部分基因在酶的作用下使碱基对分开植入对应基因，筛选时用dna探针即可
第3个回答 2012-11-27
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