DNA琼脂糖凝胶电泳出现拖尾的原因是什么

如题所述

电泳出现拖尾现象,英文成为smear,就是弥散.其原因,主要从以下两个方面考虑:
1、PCR产物自身原因:
往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多.
对策:①减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶.②减少dNTP的浓度.③适当降低Mg2+浓度.④增加模板量,减少引物的用量 ,减少循环次数,提高退火温度.
2、电泳体系的问题:
(1)电泳缓冲液TAE或者TBE的污染,建议更换缓冲液.(2)上样时样品漂了,建议增加上样缓冲液的用量,以及小心加样.(3)电压太高.(4)适当把你的胶的浓度加大.(根据你的片断大小而定)(5)观察你的marker是否也存在拖尾现象,作为对照.
以前有挺多人问过这个问题了 借用下以往问题的最佳答案
温馨提示:内容为网友见解,仅供参考
第1个回答  推荐于2017-09-01
原因有以下:
1、 可以考虑是不是样品不纯,目的产物与杂带相差不大,所以要多跑一段时间才有尾巴。参考marker,marker应该不会有。如果有的话说明配胶有问题。
2 、琼脂糖检测DNA一般去1~5微升原液,加2微升溴酚蓝便可,注意上样浓度;
3、可能是原液浓度太大造成的;
4、可能DNA已降解。
5、在提取前对样品进行一定的脱腐处理呀。很简单。有一种TENP buffer,文献中查的到的。
6、 DNA降解避免核酸酶污染。
7、 DNA上样量过多,可以减少凝胶中DNA上样量。
8、 所用电泳条件不合适,可以将电泳时电压不应超过20V/cm,温度<30℃,巨大DNA链,温度应 <15℃,核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力。
9、 DNA样含盐过高,可以在电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐。
10、 有蛋白污染,可以采用电泳前酚抽提去除蛋白。
11、 DNA变性,电泳前勿加热,用20mM NaCl缓冲液稀释DNA
第2个回答  2020-10-23
第3个回答  2020-10-17

DNA琼脂糖凝胶电泳出现拖尾的原因是什么
电泳出现拖尾现象,英文成为smear,就是弥散.其原因,主要从以下两个方面考虑:1、PCR产物自身原因:往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多.对策:①减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶.②减少dNTP的浓度.③适当降低Mg2+浓度....

琼脂糖凝胶电泳跑的DNA为什么会拖尾
由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物过多。对策:减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶;减少dNTP的浓度;适当降低Mg2+浓度;增加模板量,减少引物的用量,减少循环次数,提高退火温度。琼脂糖的熔点在62〜65°C之间,融化...

琼脂糖凝胶电泳跑的DNA为什么会拖尾
主要原因可能有以下几点:1、DNA上样量是否过大,可适当减少上样量;2、电泳参数的设置是否合适,可适当调整电压及胶浓度;3、产物是否特异,如是否存在非特异性产物等。

问一下,就是,请问电泳DNA是否出现拖尾现象是要怎么判断的?
3. 提基因组DNA的时候也常出现拖尾,最可能的就是提的DNA中掺杂有蛋白质,蛋白质会拽DNA的泳动。所以一定要注意提取基因的操作,减少蛋白质等杂质的出现。4. 样品破碎或是被降解 5. 存在RNA:DNA前面的一片一般都是未清除的RNA,经过纯化,RNAse处理,就没有了 6. 电泳体系的问题:观察你的marker...

DNA琼脂糖凝胶电泳分析
你好!可能是DNA提纯浓度不够,所以会出现拖尾,也有可能是配胶浓度不对,比如1.5%的gel你配成1%,也有可能是电泳时间或者电压、电流调的不对,条带还没有跑到指定位置。建议看相关文献,看别人跑相同的DNA或RNA的条件是什么,然后再根据自己的实验进行优化。

DNA的琼脂糖凝胶电泳孔内为什么会残留一部分DNA
DNA的琼脂糖凝胶电泳孔内为什么会残留一部分DNA 电泳出现拖尾现象,英文成为smear,就是弥散.其原因,主要从以下两个方面考虑:1、PCR产物自身原因:往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多...鉴定基因组时候有降解,即完整性(...

DNA电泳为什么标记的分子量大了就拖带,什么原因?
一般大分子量是会有些拖尾,但是不会这么严重。可能有以下一些原因:1、电泳电压太高;2、缓冲液放置太久;3、凝胶质量不理想(对你这个结果而言这种可能性不太大);4、凝胶浓度偏高。

琼脂糖凝胶电泳时,泳道很亮,但是没有明显的目的条带,呈明显的拖带现象...
可能原因:1.取样不够2.操作过程中机械损伤3.缓冲液加量不够4.凝胶未完全融化

琼脂糖凝胶电泳和醋酸纤维素薄膜电泳的条带出现跑带,拖带,多带以及其他...
能不能附上你跑完的凝胶图上来?三个大的方面:1.样品处理问题。样品纯度差,跑DNA电泳时有杂质蛋白污染(琼脂糖的话可以在紫外光下检查上样孔是否有白色亮团);样品上样前已有部分程度的降解(拖尾)。2.试剂问题。凝胶要配好一点(尽量用新鲜的试剂,新鲜配制后即电泳),胶的浓度把握到位。

全基因组DNA跑胶拖尾
后来就用2ul的,效果还不错。至于样品前面拖尾,我觉得不一定是RNA污染吧,即便是有RNA污染,也不会有你描述的这种拖尾吧,看是否有RNA的污染主要是看是否有28s 18S RNA的条带,造成拖尾的原因我觉得可能还是胶制得不太好,注意跑胶时所用的电压,还有制备胶用的缓冲液和电泳时的缓冲液要一致。

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