紧急求助,有谁用过promega的总RNA提取试剂盒

如题所述

第1个回答  2017-07-16
promega的试剂盒我用了1个多月,提总RNA很好的,我们实验室一直在用,我们提取的RNA跑电泳很好,RT-PCR之后的actin也很好,说明我们的提取没有问题。至于最后我们是溶于30ulDEPC水中。我其中的步骤如下: 1.在培养皿中加入2ml Trizol,裂解细胞5min。 1.转移裂解液到2只EP管中,加入0.2ml氯仿,剧烈震荡15s,放置3min,4℃12000转离心15min。 2.吸取上层水相到另2只EP管中,加0.625ml异丙醇,混匀,4℃放置2小时,4℃12000转离心10min,弃上清,可见少量白色沉淀贴于管底。 3.每只EP管加1.5ml冰乙醇,振荡,4℃7500转离心5min。 4.倒去上面液体,自然晾干10min,每管30μl,-80℃保存。 若短期保存,上面就行了,若长期应该逆转录成CDNA保存。 跑出的电泳带用肉眼根本看不出亮度的差别,应该说差别不大本回答被提问者采纳

promega抽提试剂盒不小心打翻了其中的一个成分,能单卖这一个成分吗...
promega的试剂盒我用了1个多月,提总RNA很好的,我们实验室一直在用,我们提取的RNA跑电泳很好,RT-PCR之后的actin也很好,说明我们的提取没有问题。至于最后我们是溶于30ulDEPC水中。我其中的步骤如下: 1.在培养皿中加入2ml Trizol,裂解细胞5min。 1.转移裂解液到2只EP管中,加入0.2ml氯仿,...

提取RNA,然后做逆转录需要什么试剂及试剂盒?
看你要提什么RNA了,如果是总RNA建议用TRIZOL法,反转录用一步法或两步法反转录试剂盒,如果你要做双链cDNA,接下来还要进行第二条链合成,有双链cDNA合成试剂盒,也有这两步都包括的试剂盒。

RNA的提取方法大总结
基于Shomczynki和Sacchi两人于1987年报道的RNA快速提取法,美国Promega公司有机地将这些试剂组合成总RNA试剂盒,使操作更为简单方便,并突出体现以下几个优点:1)将已知最强的RNase抑制剂异硫氰酸胍、b-巯基乙醇和去污剂N-十二烷基肌氨酸钠联合使用,抑制了RNA的降解,增强了对核蛋白复合物的解离,使RNA与...

如何选择最佳的全血DNA,RNA提取方法
III. 非抗凝血(凝固血)能否提取?答案是肯定的,而且一点都不麻烦,提取效果和抗凝血没有差别!在你找遍了进口的所有品牌都找不到后,回过头来您才发现原来他就在身边,百泰克的凝固血基因组DNA提取试剂盒已经有很多忠实的用户。2、 全血RNA如何提取 I. 全血RNA提取过程哪些是RNA降解的因素...

分离mRNA过程中,如果RNA有DNA污染会有影响吗
会有影响。因为提取的RNA有DNA污染,那么反转录以后的cDNA也就有基因组DNA污染,这样,扩增cDNA。都会出现杂带或非特异性扩增,对实验结果不好。由一个DNA分子,边解旋,边转录。利用细胞核内部的游离核糖核苷酸合成。合成规则遵循碱基互补配对原则。以上过程叫做转录,在细胞核中完成。接着,mRNA穿过核孔。

有谁能详细说一下全基因组Bisulfite Sequencing的流程
第一部分 基因组DNA的提取。这一步没有悬念,完全可以购买供细胞或组织使用的DNA提取试剂盒,如果实验室条件成熟,自己配试剂提取完全可以。DNA比较稳定,只要在操作中不要使用暴力,提出的基因组DNA应该是完整的。此步重点在于DNA的纯度,即减少或避免RNA、蛋白的污染很重要。因此在提取过程中需使用蛋白酶K及RNA酶以去除...

北京艾德莱公司填补Qiagen空白植物RNA提取的试剂盒怎么样,好用吗?
EASYspin植物RNA快速提取试剂盒,第一:采用直接过柱子方法,彻底抛弃了TRIzol苯酚,氯仿原理方法,使用无毒原料,并且添加了有自主知识产权的去除多糖多酚成分解决了多糖多酚和代谢产物对于RNA的破坏和干扰分离。第二:突破了直接过柱子的方法DNA去除的技术难点,解决了DNA残留过多问题。

...医学方向..,翻译器有道神马的就别来了~了 RNA i
为测量的mRNA(信使核糖核酸)水平,将对照和解体寄生虫中的总RNA(8个阳性后体碎片)进行反转录(BioRad合成试剂盒),并用含SYBR绿色试剂盒的GoTaq定量多聚酶链反应(qPCR)超级混合包在应用生物系统一步加的仪器上进行实时定量聚合酶链反应(PCR)。Transcript levels were normalized to the mRNA levels...

我的逆转录试剂盒室温下放了6个小时还能用吗
trizol法提取大小RNA,trizol买invitrogen公司的。逆转录用promega公司的M-MLV

求高人帮忙翻译下文章 生物类的
为qRT - PCR分析,总RNA分离使用队总RNA提取试剂盒(盒) 。 SuperScriptTM三逆转录酶( Invitrogen公司)被用来合成第一链cDNA与寡核苷酸引物(或随机hexamers由热科学,英国的分析刚果解放阵线的表达联合体从事转基因植物内源基因刚果解放阵线和刚果解放运动)和1微克总RNA ,在50 ° C的1小时定量聚合...

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