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1 ææ容å¨é«æ¸©çè两次ï¼DEPCé«æ¸©çèï¼ææçè¯åç¨DEPCé
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2 å¨ä¸çè2mL管ä¸å å
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é¨çRNA没æ水解RNAçæºä¼ã å°éº¦çé»åèå 为没æå
åä½ç¨ï¼æ以å«ç³å°ï¼æäºæ½æã
4 æ··å,å°æµ´30minã
5 4â,12000rpm,10minã
6 ä¸æ¸
è³å¦ä¸ç¦»å¿ç®¡ä¸ å 0.4Ml氯仿ï¼å§çéè¡ãå°æµ´æ¾ç½®5minã å»èç±»ã
7 40C,12000rpm,10minã
8 å¼ææºç¸ï¼ä¸å±ï¼ å å
¥0.4Ml氯仿å0.4Mlé
ã室温æ¾ç½®5minã å»èç±»åèç½è´¨ã
9 40C,12000rpm,10min å¼ææºç¸ï¼å å
¥çä½ç§¯å¼ä¸éã-200Cæ¾ç½®1hã å»ç³ï¼è±æ°´ãå 为ä½ç³»é«çï¼2mol/L NaAcï¼ï¼æ以å¯ä»¥ä½¿RNAæ²æ·ã
10 40C,12000rpm,10min æ²æ·ç¨70%ä¹éæ´ä¸¤æ¬¡ã å 为æåºçéå¾å°ï¼å¯è½ä¸å¯è§ï¼æ以离å¿æ¯è¦ææ¹åæ è®°ã
11 室温ç¨å¹²ç¥ã RNAæ¯é常ä¸å¥½æº¶è§£çï¼æ以åªè½ç¨å¹²ç¥ãè¥ä¸æº¶è§£æ¯å 为æ太å¤çç³çæ®ä½ã
12 æ²æ·å 20uLDEPC水溶解(-200Cä¿å) DEPCæ°´ä¸ä¸å«RNAé
¶ã
13 RNAçµæ³³ï¼ 1ï¼
ç¼èç³è¶20 mL 8μLæ ·å 1μLæ ·åç¼å²æ¶² 1μLSYBR 100Væåçµæ³³ æµOD260åOD260ï¼OD280
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